<th id="rdh5z"></th>
<strike id="rdh5z"><video id="rdh5z"></video></strike>
<strike id="rdh5z"></strike>
<th id="rdh5z"><noframes id="rdh5z">
<progress id="rdh5z"></progress>
返回首頁 聯系我們
公司動態
當前位置:首頁 > 公司動態 > 詳細解讀美國伯樂熒光定量PCR的工作原理
詳細解讀美國伯樂熒光定量PCR的工作原理
點擊次數:1469 更新時間:2021-12-09
 
  美國伯樂熒光定量PCR(Real-timePCR),是指在PCR擴增反應體系中加入熒光基團,通過對擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
 
  美國伯樂熒光定量PCR工作原理:
 
  以探針法熒光定量PCR為例:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。開始時,探針完整地結合在DNA任意一條單鏈上,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收,檢測不到熒光信號;PCR擴增時,Taq酶將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。
 
  傳統的PCR進行檢測時,擴增反應后需要進行染色處理及電泳分離,并且只能作定性分析,不能準確定量,易造成污染出現假陽性,使其應用受到限制。實時定量PCR技術不僅實現了對模板的定量,且具有靈敏度高、特異性和可靠性更好、自動化程度高和無污染的特點,使得熒光定量PCR逐漸取代常規PCR。
 
  在PCR擴增反應的最初數個循環里,熒光信號變化不大,接近一條直線,這樣的直線即是基線,這條線是可以自動生成也可以手動設置的。之后反應會進入指數增長期,這個期間擴增曲線具有高度重復性,在該期間,可設定一條熒光閾值線,它可以設定在熒光信號指數擴增階段任意位置上,但一般會將熒光閾值的缺省設置是3-15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍。每個反應管內的熒光信號到達設定的閾值時所經歷的循環數被稱為CT值,這個值與起始濃度的對數成線性關系,且該值具有重現性。
有码无码中文字幕丝袜电影,国产日韩欧美亚欧在线观看,欧美一区二区三区精品视频,亚洲永久精品ww47人人网,国色天香在线日本电影 国产成人精品视频久 中国人免费视频在线观看 高清无码久道中文字幕 免费国产线观看免费观看 亚洲成a人片在线观 免费无码国产永久入口 国产日韩欧美有码在线视频 欧美成人亚洲高清在线观看 伊人激情AV一区二区三区精品